慢病毒载体构建在线咨询 苏州博特龙公司

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博奥龙公司主要产品有抗0体制0备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

Western Blot-抗0体检测技术服务?

一、服务内容

1、从动物细胞、人或动物***、***、植物等样品中提取蛋白，重组蛋白、血0清、培养上清等样品

2、对样品中蛋白进行半定量分析

3、Western blot检测

（1） 电泳：聚丙0烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）分离蛋白样品

（2） 湿法转印（BLOTING：Tank Transfer）

（3） 杂交：用抗0体鉴定膜上的特定蛋白（INCUBATION: Antibody）

（4） 化学发光检测（ECL），胶片***，TotalLab Quant软件读取IOD值（可选）

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不同亚型的抗0体在结构上有所区别，其免0疫源性与在体内发挥的作用存在差异，对抗0体进行进一步的细分，并进行抗0体亚型鉴定，对于***作用机理的研究、抗0体药0物的开发有重要意义。那么什么是抗0体亚型鉴定？众所周知，亚型指的是相同的构成方式，但是空间结构不同的蛋白质结构。抗0体亚型，指的是在机体内产生的“Y”构型的免0疫球蛋白（Ig），基于小分子多肽结构上的差异，可以进一步的进行细分。相关抗0体亚型鉴定有：IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3，IgM，IgA 的鉴定。

实验步骤：

1、弃去板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各100μl，通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。

2 、吸弃板内液体，洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂 A 和显色剂 B 各50μl，换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。

3 、ELISA***盒特异性好一般肉眼即可观察出结果，看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类。更可将反应终止液（每孔50μl）终止反应后用酶0标仪450nm 测长，630nm 参考波长双波长测定结果，参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类(阳性对照 OD 一般不小于0.8，阴性对照一般不高于0.15，阳性判定标准：样品 OD 大于阴性 OD+0.15，阴性 OD 低于0.05按0.05算)。