腺病毒滴度检测承诺守信 博特龙公司

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

β-actin的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照。也常被用于免0疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时，Actin抗0体和Tubulin抗0体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同，这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。

保存条件：

      Actin抗0体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。

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多抗制备的概念：由多个B淋巴细胞克0隆所产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗0体。多抗制备主要包括以下几个步骤：免0疫动物、佐剂、免0疫原、免0疫、取血等。

多抗制备的制备步骤

一、器材

剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼0科***镊子(游离血管用)一把、直头眼0科***剪(剪血管用)一把，***刀架，***刀片，注0射器(1ml、10ml，25ml)附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，***缝合线，塑料放血管，纱布等。

二、***

生理盐水

弗氏完全佐剂

弗氏不完全佐剂

二甲0苯，酒精棉，脱脂棉，2% NaN3

三、免0疫原：蛋白或KLH偶联的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。

四、兔子的选择

兔子的重量应在四斤以上，两耳光滑，明显可见耳静、动脉，健康。

五、免0疫

用生理盐水稀释免0疫原，然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂，将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下0注0射和后大腿进行肌肉注0射。每个区域大约用1/4的免0疫原。这样免0疫原可以持久存在从而提高免0疫应答。

取血：

免0疫一周后，可以耳动脉取血检测抗0体效价。因为起初几次免0疫产生的抗0体的效价比较低，头两次取血，够检测用即可。在三次免0疫后，可以获得较高0效价的抗0体，每次取血量可以在40ml，不要取太多，否则会造成兔子贫0血。

前几次取血用19号针头对兔子进行耳动脉取血，室温过夜析出血0清。

***后一次取血可以采用颈动脉放血，具体操作如下：

1、家兔仰卧于兔架上固定头部，用纱布固定四肢。头部略放低以暴露颈部。剃毛并消毒皮肤。

2、沿颈部中线用***刀切开皮肤约10cm，分离皮下结缔***，直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌(小心操作，如碰到小血管出血，可用止血钳止血)。

3、用直头止血钳分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松***，暴露出颈总动脉后用弯头眼0科镊使之游离，剥离***和结缔***。

4、于动脉下套入两根黑丝线，分别置于远心及近心端。结扎远心端的丝线。近心端的动脉用血管夹夹住。

5、用小拇指垫在血管下，用尖头眼0科***剪在两根丝线间的动脉璧上剪一小口(勿剪断)，插入塑料放血管。再将近心端的丝线结扎固定于放血管上，以防放血管滑脱。

6、松开止血钳，使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。

如果机体内B细胞缺失或减少，***因缺乏抗0体往往反复出现微生物所致的，常引起脓皮病、化脓性、、气管炎和等；患的人，IgG、IgA都有一定的；患慢性淋巴细胞性的人则屯IgA和IgM降低。

B细胞和T细胞一样，在未接触抗原之前，不能产生效应。必须受到抗原刺激，并在辅助T细胞和巨噬细胞协助下，经过抗原与抗原受体相互识别，D细胞进入状态，通过增殖转变为有效应的浆细胞后，才能产生抗0体。