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刘总 先生
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发布时间:2022-07-21 14:04:56
细胞冻存步骤
1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5分钟离心收集培养细胞沉淀,彻0底弃去离心管中的上清液。
4. 加入适量的CELLS***ING?细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。
6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。
7. 如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天时间,方可移至液氮罐中保存。
产品描述:
使用动物血0清常会遭遇许多问题,例如:病毒感0染、或是其他动物源的污染原。使用无血0清制品培养与冻存细胞,可以消除这方面的隐患。此外,无血0清培养基可以确保细胞在化学成分固定的条件下生长,更进一步确保细胞冻存时的条件稳定。
Biological Industries(BI)开发无血0清细胞冻存液,细胞冻存与复苏后,平均活细0胞回收比例超过80%。与含血0清冻存液比较,BI无血0清冻存液细胞存活率都有较佳的表,BI无血0清细胞冻存液也适用于动物血0清培养的细胞冻存。
复苏细胞:
1. 将细胞冻存管由液态氮中取出,置于37度水浴快速溶解回温。此时可准备培养基、无菌15ml离心管、培养瓶。
2. 于生物安全柜内,直接以少量培养基反复冲融,使细胞团块化冻。
3. 先在无菌15ml离心管中加入5ml培养基,再将化冻的细胞悬液加入离心管中。以200~300g,3分钟离心收集细胞。
4. 倒去上清液,以新鲜培养基重悬细胞,移到培养瓶中培养。
5. 隔天更换新鲜培养基,并观察细胞存活状况。
您是否也经常有这些困扰?
每次冻存细胞都需要现配冻存液,太麻烦
程序降温(4℃~-20℃~-80℃~液氮),太繁琐太耗时
90%血0清+10%DMSO冻存,成本太高
细胞比较娇贵,细胞冻存后复苏率太低
日本A/B品牌无血0清冻存液好用,价格太高
那是时候换一款无需程序降温的细胞冻存液了~~
特别配方有效提高细胞冻存活率和复苏活力
不含血0清,不含动物来源性蛋白
能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染
确保冻存细胞安全
通用于各种动物细胞株
适用于一般培养细胞的冻存
也适用于无血0清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存
操作简便,无需程序降温
直接置于-80℃冰箱长期保存
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