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QuickAntibody-Mouse5W （5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂）

QuickAntibody-Mouse5W用途

通过5周2针的标准免0疫程序制备小鼠单克0隆和多克0隆抗0体，ELISA滴度（Cutoff值为0.1000）可达到1:10000-1:10000000。

QuickAntibody-Mouse5W使用方法（详见使用说明书）

1.    用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度（按每针次50μl用量配制）。

备注：推荐使用的抗原用量为

（1）免0疫原性较强的灭活全病毒或全***以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg；

（2）免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg；

（3）偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。

2.    充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需用量（按每针次50μl）与抗原按体积比1:1迅速混匀。

备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。

QuickAntibody的一个重要用途是可方便地用于制备小鼠多克0隆抗0体。常规多克0隆抗0体制备多使用兔子，不但免0疫针次多、抗原用量大和抗0体产生慢，而且由于技术要求较高而往往需要委

托专门单位制备。使用QuickAntibody免0疫佐剂，任何实验动物人员均可方便快速地制备小鼠多克0隆抗0体，标准免0疫程序只需要简单地免0疫5只小鼠，即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体。（强烈推荐使用本佐剂制备小鼠多克0隆抗0体，1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体足以满足绝大多数用户的实验需求，包括用于酶联免0疫、免0疫印迹、流式细胞、免0疫组化和免0疫沉淀等）。

QuickAntibody建议常温运输，2~8oC保存，无菌取用，有效期18个月。

材料与方法

一、材料

AFP购自上海领潮公司。SP2／0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8～12周龄Balb／c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。

二、方法

1．动物免0疫：将4只8～12周龄Balb／c小鼠随机分为两组，每组2只，分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…，第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液，析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。

第yi组：AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma，美国)混合，充分乳化后注入8～12周龄Balb／c小鼠腹腔，2周后用同量抗原加不完全福氏佐剂(Sigma，美国)腹腔***，4周后用同量抗原加不完全福氏佐剂腹腔***，融合前3 d作腹腔***加强免0疫。

1.免0疫：本产品与抗原混合搅拌能很快形成油包水状态，在1:1-1:2情况下都能形成稳定的乳液，1:2乳化较1:1粘稠些，乳化后滴水数周不散；经多品种抗原多种属动物测试免0疫效果极0好，由于乳

化彻0底牢固，因此跟其他佐剂相比比较不容易出现免0疫耐受现象。

2.单抗腹0水制备：将佐剂***BALB/C小鼠腹腔，每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右（一般12-18天），然后***杂交瘤细胞，建议每只***80万-100万个。腹0水会比普通佐剂晚出1.5天-2天，但通

常情况下腹0水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍，且单抗腹0水效价不变。