HRP-小鼠抗大鼠IgM *常用指南「博特龙」

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博奥龙公司主要产品有抗0体制0备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

Western Blot-抗0体检测技术服务?

一、服务内容

1、从动物细胞、人或动物***、***、植物等样品中提取蛋白，重组蛋白、血0清、培养上清等样品

2、对样品中蛋白进行半定量分析

3、Western blot检测

（1） 电泳：聚丙0烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）分离蛋白样品

（2） 湿法转印（BLOTING：Tank Transfer）

（3） 杂交：用抗0体鉴定膜上的特定蛋白（INCUBATION: Antibody）

（4） 化学发光检测（ECL），胶片***，TotalLab Quant软件读取IOD值（可选）

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多抗制备的概念：由多个B淋巴细胞克0隆所产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗0体。多抗制备主要包括以下几个步骤：免0疫动物、佐剂、免0疫原、免0疫、取血等。

多抗制备的制备步骤

一、器材

剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼0科***镊子(游离血管用)一把、直头眼0科***剪(剪血管用)一把，***刀架，***刀片，注0射器(1ml、10ml，25ml)附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，***缝合线，塑料放血管，纱布等。

二、***

生理盐水

弗氏完全佐剂

弗氏不完全佐剂

二甲0苯，酒精棉，脱脂棉，2% NaN3

三、免0疫原：蛋白或KLH偶联的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。

四、兔子的选择

兔子的重量应在四斤以上，两耳光滑，明显可见耳静、动脉，健康。

五、免0疫

用生理盐水稀释免0疫原，然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂，将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下0***和后大腿进行肌肉***。每个区域大约用1/4的免0疫原。这样免0疫原可以持久存在从而提高免0疫应答。

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抗0体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链)；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种，重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 整个抗0体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中，不同抗0体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。

在血液、和***液里的抗0体主要是IgM和IgG。在正常血浆中，IgM约占血浆内总抗0体量的10％。IgM的杀菌、溶菌、促进吞噬作用及凝集抗原的作用都比IgG强，它也能中和***外和阻止病毒。人若缺乏IgM，可能引起致死性的。IgG占血浆内抗0体总量的70％～0％，由于它的分子量较小，通透性大，所以在体内分布。它能进入***液和脑脊液内；并能通过进入胎儿体内。IgA具有明显的和抗病毒作用，分泌型的IgA存在外分泌物中，如初乳、泪液、唾液、胆汁以及消化道、呼吸道和尿、生殖道的粘膜分泌液中。而且，血液中的，IgA也能在里形成大量分泌型IgA，由胆汁排人十二指肠，构成外界物质通向体内的道防线，阻止上述管腔内的抗原物质在管壁附着。因此，IgA是抗粘膜的一个重要抗0体，使整个内脏的功能都能得到增强。