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沉淀型TMB单组份（HRP底物）  

即用型，用于标记物为HRP的WB实验。TMB在辣根过氧化物酶的催化下与氧化剂反应生成水溶性的蓝色产物，此产物可被沉淀出来用于免0疫印记（WB）实验。本品具有非常高的灵敏度，特别适用于需要较高信噪比的实验。TMB是一种非致***性底物，不易褪色，优于DAB、AEC和4-CN。

Catalog_no BF06009

Product_name  沉淀型TMB单组份（HRP底物）

Category   WB、IHC、ELISA相关***

产品介绍

生物素/亲合素-HRP 系统提供在冰冻切片、石蜡包埋***和细胞涂片中细胞表面抗原和胞内抗原快速和精0确***的方法。***盒包括正常山羊或兔血0清、生物素标记的二抗和亲合素标记的 HRP。此系统与兔、小鼠来源的一抗使用。非特异性染色用与二抗同种动物的血0清封闭。***、细胞片与未标记的一抗反应后，加生物素标记的二抗，孵育后，洗去二抗，与亲合素辣根酶孵育，洗去后加底物。

***盒组成

1. 洗涤缓冲液（10×浓缩）：100ml×2

2. 血0清封闭液：含 10%灭活正常山羊，含防腐剂：50 ml

3. 生物素标记的二抗：含 2.0 μg/ml，0.01M PBS，pH7.4，稳定剂和防腐剂，工作液。规

格：山羊抗兔 50ml；或山羊抗小鼠 50ml

4. 亲合素-HRP，含 2.0 μg/mL，0.01M PBS, pH7.4，稳定剂和防腐剂，工作液，规格：亲

合素-HRP 50ml

加生物素化抗0体

1. 去掉缓冲液，擦掉切片周围的液体。

2. 加生物素化抗0体，完全覆盖切片。

3. 室温孵育 30min。

4. 用洗涤液洗去抗0体，用洗涤液润洗 5min。

加亲合素-HRP

2. 加亲合素-HRP，完全覆盖切片。

4. 用洗涤缓冲液洗去亲合素-HRP，用洗涤缓冲液润洗 5min。

显色

1. 加显色液（自备）显色。

可能出现的问题和解决方法

过度染色

1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。

2. 不完全脱蜡。

3. 过度***粘附。

4. 一抗稀释度不当。

5. 蛋白质非特异性结合。

不染色

1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。

2. 处理过程中抗原***。

3. 固定不当。

4. 用含叠氮钠洗涤液。

5. 操作过程中样品彻0底干燥。

6. 未按操作程序操作。

染色较弱

1. 加免0疫***前没有将洗涤液去掉。

2. 抗0体稀释不当。

3. 显色前底物放置时间过长。

4. 过氧0化氢的***作用。