HRP-兔抗狗IgG(H+L)择优推荐「博特龙」

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

多抗制备的概念：由多个B淋巴细胞克0隆所产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗0体。多抗制备主要包括以下几个步骤：免0疫动物、佐剂、免0疫原、免0疫、取血等。

多抗制备的制备步骤

一、器材

剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼0科***镊子(游离血管用)一把、直头眼0科***剪(剪血管用)一把，***刀架，***刀片，注0射器(1ml、10ml，25ml)附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，***缝合线，塑料放血管，纱布等。

二、***

生理盐水

弗氏完全佐剂

弗氏不完全佐剂

二甲0苯，酒精棉，脱脂棉，2% NaN3

三、免0疫原：蛋白或KLH偶联的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。

四、兔子的选择

兔子的重量应在四斤以上，两耳光滑，明显可见耳静、动脉，健康。

五、免0疫

用生理盐水稀释免0疫原，然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂，将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下0***和后大腿进行肌肉***。每个区域大约用1/4的免0疫原。这样免0疫原可以持久存在从而提高免0疫应答。

单克0隆抗0体（单抗制备）制备过程有以下几个步骤：

步骤一：细胞免0疫

免0疫动物免0疫动物是用目的抗原免0疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。 一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠，按照预先制定的免0疫方案进行免0疫***。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免0疫器0官，刺激相应B淋巴细胞克0隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。

步骤二：细胞融合

采用眼球摘除放血法处死小鼠，无菌操作取出脾0脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨0髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙 二醇。在聚乙 二醇作用下，各种淋巴细胞可与骨0髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。

单克0隆抗0体的大量制备

单克0隆抗0体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。

1、体内诱生法 取Balb/c小鼠。

首先腹腔***0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克0隆抗0体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注0射器抽取腹0水，即可获得大量单克0隆抗0体。

2、体外培养法

将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克0隆抗0体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克0隆抗0体。但这种方法产生的抗0体量有限。近年来，各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗0体的生产量。

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人出生前，体内已经有分化成熟的B细胞并分布在血液和淋巴中。B细胞成熟的标志是：它们的细胞膜上有了球蛋白样结构形式的特异性抗原受体。出生后，在中以每天100万个的速率产生B细胞。在抗0体方面，新生儿不能产生抗0体，其血浆中的IgG是胎儿时期由母体经转运到胎儿血循环中的；出生3个月后，在外周血中开始能检测出他自身产生的抗0体;1岁时，血液中IgM含量可达到***的水平；6～7岁时，IgG和IgA也达到了***的水平。