增强型转染***价格合理「博特龙」

注意事项：

1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。

2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，高压消毒或除0菌过滤。

3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含 5~10%牛血0清的

DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。

4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染***用量为 3~5μl，请

在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告***进行优化。

5. 如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系，可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染，从而可节省

18~24 小时的转染前细胞培养时间。

公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、近300种病理级抗0体、近3000余种病毒蛋白及病毒抗0体，另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

北京博奥龙免0疫技术有限公司专0业从事新型生化***的研发和销售，公司理念是通过自主创新的品牌产品改变传统实验模式，使研究变得更轻松、更高0效。公司目前主要围绕抗0体制备、免0疫检测、细胞转染、病毒包装和细胞冻存等领域，健全自己的产品和服务。公司现有自主知识产权产品包括：QuickAntibody系列快速免0疫佐剂--用于快速制备小鼠单、多抗；QuickShuttle系列转染***--用于快速细胞转染和病毒包装；

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备***产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关***及诸多特色产品和特色技术服务。

使用方法

1. 将新鲜消化的 BHK-21 细胞接种到 24 孔细胞板中，每孔 1~2×105细胞，1ml 完全培养基。备注：可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染，无需 18~24 小时的等候时间。

2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染***分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注：质粒 DNA 和转染***的***适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。

3. 合并上述两溶液并混匀。备注：无需其它转染***所需的 10~30 分钟的等候时间。

4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中，用加样器吸打混匀。备注：转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。

5. 将细胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注：无需在转染后 4~6 小时补加血0清或更换培养基。

6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。

注意事项：

1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。

2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，高压消毒或除0菌过滤。

3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含 5~10%牛血0清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。

4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染***用量为 3~5μl，请在正式实验前根据不同培养基用报告***进行优化。

5. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至 80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞，将明显影响立传立转的效率。

6. 立传立转对细胞状态要求较高，如果转染效果不理想，可按 QuickShuttle-Enhanced 的转染方法（见本说明书第 4 页），在细胞贴壁后进行标准转染操作。