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发布时间:2021-12-22 08:51:39
细胞冻存步骤
1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5分钟离心收集培养细胞沉淀,彻0底弃去离心管中的上清液。
4. 加入适量的CELLS***ING?细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。
6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。
7. 如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天时间,方可移至液氮罐中保存。
产品特性
l 无动物源成分,无各类病毒、霉菌和支原体等污染的可能性
l 热源水平低于药典标准1/10,减少外源内毒0素干扰
l 无血0清成分,所有成分均为原0料药级别,极大降低批次间差异
l 冻存细胞复苏率高达90%
l 即用型产品,无需程序降温,冻存于-80℃冰箱或液氮中长期保存
操作方法
选择对数生长期的细胞冻存,有助于提高细胞复苏存活率。
1.1按照常用方法悬浮细胞或贴壁细胞收集于离心管中。
1.2 1000rpm-1500rpm,5min离心,弃上清液。
1.3加入适量的Serum-Free细胞冻存液于离心管中,推荐细胞冻存浓度为 1×106 - 1×107 cells/ml。缓慢混合均匀,制成细胞悬液。
1.4将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。
1.5直接将冻存细胞放入-80℃冰箱,24h后转入移至-196℃液氮罐长期冷冻保存。
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