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发布时间：2021-11-26 02:01:23
哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。
将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类，即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微***、电穿孔、脂质体介导的转染，以及***近出现的以高分子聚合物为载体的***传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体,通过病毒感0染的方式将外源DNA 导入到细胞中, 其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统***为常用。
转染***简介：
其中病毒载体的特点是整和效0率高, 可使外源***在宿主细胞中长期表达，缺点是存在潜在的安全***性。电穿孔法及显微***法的特点是转染率较高，缺点是需要昂贵的仪器，前者对细胞的损伤较大，后者在导入DNA 时需要一个细胞一个细胞地***，不适合大量细胞研究的需要。
人们一直在寻找更有效、毒性小同时对研究影响也小的转染***。由于脂质类转染***对细胞的毒性是由其脂质特性决定的，众多的研究者和生物公司将新一代转染***的开发聚焦在非脂质体的聚合物上，并已有一些优0秀的***产品上市。
磷酸钙在良好的转染条件下，可以在293T等细胞的转染达到较高的转染效率。但磷酸钙转染有一个突出的问题，非常不稳定，尤其受PH值的影响非常大，在实验中使用的每种***都必须小心校准，保证质量，因为甚至偏离***优条件十分之一个PH都可能导致磷酸钙转染的失败，经常即使***熟练的转染实验者也不能保证每次磷酸钙转染的成功，他们可能经常为莫名其妙的转染失败而沮丧。同时，他们还经常发现，往往小体积的转染比如6孔板以下的转染效果比较理想，可一换到大皿，经常转染效率下降很快。磷酸钙的先天缺陷往往是实验梗阻的主要原因。
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